Подготовка биологических образцов для сканирующей электронной микроскопии: этапы от заморозки и нарезки до металлизации
время：
2023-08-23
автор：
Сканирующий электронный микроскоп (SEM) широко применяется при исследовании биологических образцов, однако для их наблюдения в SEM требуется соответствующая подготовка. Ниже приведены общие этапы — от заморозки и нарезки до металлизации — позволяющие подготовить биологический образец к анализу в сканирующем электронном микроскопе:
Фиксация образцов: Прежде всего, биологические образцы необходимо фиксировать для сохранения их структуры и морфологии. К распространённым методам фиксации относятся использование белковых сшивающих агентов (например, глутарового альдегида) или химических фиксаторов.
Криосрезы: фиксированный биологический образец нарезают на тонкие срезы, обычно с использованием ультратонкосрезного метода. Для этого образец замораживают в криостате и нарезают крайне тонкими срезами, что позволяет сохранить его внутреннюю структуру.
Дегидратация: удаление воды из замороженного среза; наиболее распространённым методом является воздействие образца при низкой температуре и пониженном давлении, что позволяет воде постепенно сублимироваться, а не испаряться в жидком состоянии.
Металлизация: биологические образцы обычно не обладают электропроводностью, тогда как для СЭМ требуется, чтобы поверхность образца была проводящей. Поэтому перед наблюдением на поверхность образца наносится тонкий слой металла; для этого чаще всего применяют методы испарения или распыления металлов.
Испарение металла: в вакуумных условиях металл (например, золото или платину) нагревают до его температуры плавления, чтобы он испарился и осёл на поверхности образца, образуя тонкий металлический слой.
Металлизация методом распыления: при использовании ионного или электронного пучка металлическая мишень распыляется на поверхность образца, что также позволяет получить тонкий металлический слой.
Наблюдение: После металлизации биологический образец готов к исследованию в СЭМ. При облучении поверхности образца в СЭМ собирают отражённые электроны или вторичные электроны, что позволяет формировать микроскопическое изображение.
Эти этапы представляют собой общую процедуру подготовки биологических образцов, однако их необходимо корректировать и оптимизировать с учётом конкретных условий. Ключевым моментом является сохранение структуры, морфологии и деталей образца при обеспечении надлежащей электропроводности его поверхности. На каждом этапе крайне важно контролировать экспериментальные условия и параметры приборов, чтобы получить высококачественные изображения, полученные методом СЭМ.
Связанные новости
Свяжитесь с нами сейчас
Высококачественные крепления из нержавеющей стали с заводскими ценами
Свяжитесь с нами
Телефон:15756003283
Электронная почта:support@zeptools.com
Адрес: провинция Аньхой, город Тунлинь, Электронный парк предпринимательства «Дунши», д. 15